换一批
换一批摘要目的:尝试通过计算机的辅助筛选基因重组组合,期望能减少人工筛选的工作量并得到高表达的蛋白.方法:从影响表达的两个因素即翻译起始区TIR的二级结构自由能和翻译起始区的密码子偏好性问题研究入手,对部分核苷酸进行了突变,利用RNA二级结构预测软件DNASISv2.5对hbFGF的TIR区起始密码子开始前35个核苷酸进行了分析,筛选出预期表达量高的组合并在实验中加以验证.结果:从32种突变方式中筛选出10条自由能绝对值最低的序列做引物,克隆至表达载体上,得到了两株高表达菌株.结论:利用计算机辅助设计可以优化和筛选实验结果,提高工作效率,降低具体实验的工作量.
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