换一批金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株的构建
Construction of OatA Deletion Mutant and Complementation of Staphylococcus Aureus
摘要目的:构建金黄色葡萄球菌(金葡菌)OatA基因敲除菌株及其回补菌株.方法:以pBT2为载体,构建金葡菌OatA基因敲除质粒pBT2-△OatA,经金葡菌RN4220修饰后电转入金葡菌USA300,利用pBT2载体对温度敏感的特点,在42℃多次传代,筛选出金葡菌OatA基因敲除菌株.以pLI50为载体,构建pLI50-OatA全基因回补质粒,电转入金葡菌RN4220,再次抽提后电转入敲除菌株△OatA,获得基因回补菌株pOatA.结果:成功构建基因敲除质粒pBT2-△OatA,经RN4220修饰电转入USA300,经PCR及测序鉴定,获得了金葡菌OatA敲除菌株△OatA.经PCR及酶切鉴定,确认pLI50-OatA回补质粒构建成功,通过金葡菌RN4220修饰后电转入敲除菌株△OatA,获得基因敲除回补菌株pOatA.结论:成功构建金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株,为进一步研究金葡菌OatA的功能及其作用机制奠定基础.
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关键词
金黄色葡萄球菌OatA同源重组基因敲除基因回补Staphylococcus aureusOatAHomologous recombinationGene knockoutGenetic complementation
分类号
Q754（分子遗传学）
栏目名称
DOI
10.13241/j.cnki.pmb.2015.15.004
发布时间
2015-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31201908）
国家重点基础研究发展计划（973计划）（2011CB944404）
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