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核酸载体lipopolyplex的制备及细胞毒性研究

Preparation and Cytotoxicity Studies of Nucleic Acids Vectors Lipopolyplex

摘要目的:为降低聚阳离子基因载体polyplex的正电荷和毒性,在其表面构建中性磷脂膜制备lipopolyplex,并测定lipopolyplex对小鼠结肠癌细胞CT26和人乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性.方法:采用PEI25KDa与DNA复合制备polyplex,在polyplex体系中加入中性脂质体和SADGE制备lipopolyplex.采用琼脂糖凝胶电泳考察lipopolyplex对质粒DNA的包裹能力;采用激光粒度仪和zeta电位分析仪测定lipopolyplex的粒径与zeta电位;采用透射电镜观察lipopolyplex的形态;采用CCK-8试剂盒考察lipopolyplex对CT26和MCF-7的细胞毒性.结果:琼脂糖凝胶电泳显示lipopolyplex可以完全包裹质粒DNA;lipopolyplex的粒径在200 nm左右,电位在-20 mV左右;透射电镜下为较为规则的球状颗粒;lipopolyplex在CT26和MCF-7细胞中的毒性明显低于聚阳离子基因载体polyplex.结论:在polyplex表面成功构建中性磷脂膜制备的lipopolyplex,可以完全的包裹DNA并且细胞毒性明显低于polyplex,在基因输送载体领域具有潜在应用价值.

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