换一批
换一批人蜕膜组织子宫内膜干细胞的分离、培养及鉴定
Isolation, Culture and Identification of Human Endometrial Stem Cell in Decidua
摘要目的:研究人蜕膜组织中子宫内膜干细胞(endometrial stem cells,EnSCs)的分离、培养及鉴定方法.方法:取人工流产患者的蜕膜组织,用胰酶和Ⅱ型胶原酶消化分离子宫内膜细胞,计数后,以极低密度接种于10 cm培养皿,分离单克隆贴壁细胞.倒置显微镜观察EnSCs形态变化及克隆形成情况;CCK-8法绘制EnSCs生长曲线,计算倍增时间;流式细胞仪分析EnSCs细胞周期及表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD146表达情况.结果:EnSCs呈长梭形,成纤维细胞样,可见粗细不等的胞质突起,增殖至80-90％呈漩涡状生长,其克隆形成率分别为3.91％和9.14 ％;EnSCs生长曲线呈“S”型,接种48 h至60h后进入对数生长期,于第9天达到平台期,倍增时间为37-52h;流式细胞仪测定EnSCs表面抗原CD29 (99.13％),CD44(97.39％),CD73 (99.68％),CD90(96.76％),CD105 (89.64％),CD146 (77.96％)呈阳性表达,而CD31 (1.30％),CD34(0.68％),CD45(1.26％)呈阴性表达,有61.79％的细胞处于G0/G1期,22.37％的细胞处于S+G2/M期.结论:采用组织消化法分离单克隆贴壁的子宫内膜细胞,能够获得纯化的EnSCs.
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栏目名称
基础研究
DOI
10.13241/j.cnki.pmb.2016.04.014
发布时间
2016-04-15
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