换一批基于改良体内肝细胞UDS试验的组织工程材料遗传毒性评估
Assessment of Genotoxicity of Tissue Engineered Materials Based on Improved in vivo Hepatocyte Unscheduled DNA Synthesis(UDS)Assay
摘要目的:采用体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验,评估交联透明质酸钠凝胶和骨修复材料的遗传毒性,为建立医疗器械及其材料的UDS试验方法提供实验依据.方法:以0.9％氯化钠注射液和棉籽油分别作为试验材料的溶剂及阴性对照,N-二甲基亚硝胺(NDMA)用于早期采样组的阳性对照,2-乙酰氨基芴(2-AAF)用于晚期采样组的阳性对照.选取SD大鼠单次给药染毒,分别于4h和16h采集肝组织,采用胶原酶灌注法分离肝细胞.细胞经5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)标记后,利用荧光显微镜测定细胞核与核质的净平均荧光强度,取50个细胞的数据用于分析DNA修复水平.结果:阳性对照组NDMA和2-AAF诱导的荧光强度显著高于阴性对照组(P＜0.01),提示成功诱发DNA损伤;交联透明质酸钠凝胶和骨修复材料组与阴性对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05),表明在本实验条件下,两种材料未显著诱导DNA损伤.结论:本研究首次将EdU标记技术应用于体内肝细胞UDS试验,采用点击化学反应实现非放射性标记,显著提升了检测的便捷性与安全性.在本实验条件下,交联透明质酸钠凝胶与骨修复材料未表现出遗传毒性.后续可扩大样本范围,延长观察周期,进一步完善医疗器械的遗传毒性评价体系.
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关键词
遗传毒性程序外DNA合成试验5-乙炔基-2’-脱氧尿苷组织工程材料GenotoxicityUnscheduled DNA Synthesis Test5-ethynyl-2-deoxyuridineTissue Engineered Materials
栏目名称
DOI
10.13241/j.cnki.pmb.2025.17.003
发布时间
2025-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2022YFC2409805）
山东省科技型中小企业创新能力提升工程项目（2023TSGC0930）
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