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基于eIF2α/ATF4/FGF21信号通路探讨抑制线粒体复合物Ⅰ对细胞糖代谢的影响

Effects of Inhibiting Mitochondrial Complex Ⅰ on Cellular Glucose Metabolism Based on the eIF2α/ATF4/FGF21 Signaling Pathway

摘要目的:探究线粒体复合物Ⅰ抑制剂对小鼠肝细胞系和肌细胞系糖代谢的影响.方法:体外培养小鼠肝细胞系和肌细胞系,设置对照组和鱼藤酮干预组,以2-脱氧葡萄糖作为探针测定不同时间、不同鱼藤酮浓度对细胞系葡萄糖摄取的影响,采用CCK8法检测细胞活性.通过RT-qPCR检测细胞葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1),GLUT4,己糖激酶 2(hexokinase-2,HK-2)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFK)的mRNA表达水平,ELISA法测定细胞成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)含量,Western blot检测真核翻译起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)磷酸化水平,转录活化因子4(activating transcription factor 4,ATF4)和 FGF21 蛋白表达水平,CHIP-qPCR 法检测 FGF21 基因启动子区ATF4表达.结果:与对照组相比,鱼藤酮组细胞葡萄糖摄取明显增加,该效应具有时间和剂量依赖性.鱼藤酮组细胞GLUT1,GLUT4,HK-2和PFK mRNA水平较对照组显著升高.与对照组相比,鱼藤酮组p-eIF2α,ATF4,FGF21蛋白表达水平显著升高,FGF21基因启动子区ATF4明显富集.结论:抑制线粒体复合物Ⅰ可能通过eIF2α/ATF4/FGF21信号通路上调GLUTs和糖酵解关键酶表达,从而改善糖代谢.

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