运用限制性立方样条分析SARS-2-S诱导形成合胞体与A549、B16细胞体外迁移能力的剂量-反应关系
Use the Restricted Cubic Spline to Analyze the Dose-Response Relationship between the Migration Ability of A549 and B16 Cells Induced by SARS-2-S
摘要目的:基于限制性立方样条(Restricted Cubic Spline,RCS)模型,探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)刺突蛋白(Spike Protein,SARS-2-S)诱导形成的合胞体与人肺腺癌细胞A549和小鼠黑色素瘤细胞B16体外迁移能力的剂量-反应关系.方法:共培养稳定转染人血管紧张素转换酶 2(Angiotensin-converting Enzyme 2,hACE2)的 A549 细胞系(A549-A)和 SARS-2-S的A549细胞系(A549-S)构建SARS-2-S合胞体体系.收集条件培养基样品[合胞体上清(Syncytial Supernatant,S-Sup)和非合胞体上清(Non-syncytial Supernatant,N-Sup)]体外培养 A549 细胞、B16-OVA 细胞及B16-F10细胞,将培养基分为S-Sup和N-Sup.采用划痕实验检测肿瘤细胞的体外迁移能力.采用重复测量方差分析SARS-2-S诱导形成合胞体与A549、B16细胞体外迁移能力的相关性.运用线性回归、RCS分析SARS-2-S诱导形成合胞体与A549、B16细胞体外迁移能力的剂量-反应关系.结果:S-Sup可促进A549、B16-OVA、B16-F10细胞的体外迁移能力.线性回归与RCS分析可知A549、B16-OVA、B16-F10细胞的细胞迁移率与合胞体浓度存在非线性关系.当合胞体浓度低于50%时,这三种细胞的体外迁移能力随其浓度升高而增强.当合胞体浓度大于50%时,这三种细胞的体外迁移能力随其浓度升高而下降.结论:SARS-2-S蛋白通过诱导形成的合胞体对A549和B16细胞的体外迁移能力表现出非线性促进作用:在合胞体浓度低于50%时,该促进作用随浓度升高而增强;当浓度超过50%后,其促进作用则随浓度升高而减弱.
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