谷氨酸棒杆菌高丝氨酸脱氢酶编码基因hom的敲除
Disruption of hom Gene Encoding for Homoserine Dehydrogenase of Corynebacterium glutamicum
摘要以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)标准菌株ATCC 13032染色体为模板,设计引物PCR扩增高丝氨酸脱氢酶编码基因(hom),在hom基因内部插入一段来源于质粒pET28a的卡那霉素抗性基因(Km),得到基因元件hom::Km;通过电击转化法将hom::Km转入出发菌株替换原菌株的hom,在含卡那霉素的平板上挑取阳性转化子,通过PCR验证得到高丝氨酸脱氢酶缺陷的重组菌.发酵结果表明重组菌C.g-hom::Km-8发酵60h赖氨酸产量达到4.7g/L,是出发菌株谷氨酸棒杆菌ATCC 13032(0.7g/L)的6.7倍.
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