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首页 > 中国生物工程杂志 > 人甲状旁腺激素-血清白蛋白融合蛋白的构建及在毕赤酵母中的表达

人甲状旁腺激素-血清白蛋白融合蛋白的构建及在毕赤酵母中的表达

Secretory Expression of the Fusion Protein PTH-HSA in Pichia pastoris

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摘要利用重叠PCR技术拼接PTH和HSA基因,并将构建好的融合基因插入到载体pUC19测序后插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOX Ⅰ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白PTH-HSA.重组质粒pPIC9K/PTH-HSA经Sal Ⅰ线性化后,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到的转化子.PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,蛋白电泳分析表明融合基因得到表达;Western b1ot分析表明发酵液上清中表达的融合蛋白PTH-HSA具有HSA的抗原性:用酶标法测定发酵上清中融合蛋白的甲状旁腺激素活性为318IU/ml.

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作者 王俊 [1] 沈微 [1] 饶志明 [1] 诸葛健 [1] 学术成果认领
作者单位 江南大学工业微生物技术教育部重点实验室,无锡,214036 [1]
关键词 人甲状旁腺激素融合蛋白表达载体pPIC9K毕赤酵母
医学主题词 蛋白(Egg White)甲状旁腺(Parathyroid Glands)毕赤酵母(Pichia)人(Persons)血清白蛋白(Serum Albumin)
分类号 Q5（生物化学）
栏目名称
研究报告
DOI 10.3969/j.issn.1671-8135.2007.02.003
发布时间 2007-04-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
  • 浏览174
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中国生物工程杂志

中国生物工程杂志

2007年27卷2期

14-18页

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