月季eIF-5A基因的表达增强宿主大肠杆菌对高温和低温的耐性
Increasing the Thermotolerance of E.coli with Expression of eIF-5A from Rosa chinensis
摘要真核生物翻译起始因子(eIF-5A)在调控生物生长发育、衰老与环境响应中起重要作用.设计eIF-5A基因的兼并引物,对月季受高温诱导的叶片cDNA进行PCR扩增,获得特异性片段,经回收、克隆和测序,确定该cDNA为月季eIF-5A(命名为RceIF5A),含有480bp的核苷酸,编码159个氨基酸.将该cDNA序列克隆到原核表达载体PET32a中,获得重组子pET32a-eIF5A.在高温(50℃)和低温(4℃)胁迫下含有该基因的大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (pET32a-eIF5A)比E.coli BL21 (pET32a) 抗性有明显的提高,据此认为含有重组子的E.coli BL21 (pET32a-eIF5A)对高温和低温的抗性可能与eIF-5A基因的表达相关.该基因GenBank登录号为 EF177192.
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