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首页 > 中国生物工程杂志 > 狐源犬瘟热病毒CDV-FOX-TA株核蛋白基因的原核表达及鉴定

狐源犬瘟热病毒CDV-FOX-TA株核蛋白基因的原核表达及鉴定

Prokaryotic Expression and Identification of Nucleocapsid Gene of Canine Distemper Virus CDV-FOX-TA Strain From Fox

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学术成果认领

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摘要应用RT-PCR技术扩增出犬瘟热病毒(CDV)核衣壳(N)蛋白基因抗原性好的高保守基因片段,将其TA克隆至pMD18-T载体中,再利用酶切、连接的方法将测序正确的N基因目的片段亚克隆到原核表达载体pET24b中6×His Tag编码基因的上游,并将该重组质粒转化大肠杆菌Rosetta 2(DE3)株,经IPTG诱导,N基因融合蛋白获得了高效表达.SDS-PAGE分析和Westernblot分析的结果显示,表达产物的分子质量为15 kDa,与CDV标准阳性血清呈阳性反应,间接ELISA结果也表明重组表达产物具有良好的抗原性,能够有效区分CDV标准阳性与阴性血清,表明大肠杆菌表达的CDV N蛋白在免疫原性上具有与天然N蛋白同样的特性,可作为检测CDV的间接ELISA包被抗原.

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作者简中友 ^[1] 贾赟 ^[2] 王全凯 ^[1] 胡传伟 ^[2] 肇慧君 ^[2] 李叶 ^[2] 学术成果认领

作者单位吉林农业大学,动物科技学院,长春,130062 ^[1] 辽宁出入境检验检疫局,大连,116001 ^[2]

关键词犬瘟热病毒核蛋白原核表达免疫原性

主题词蛋白(Egg White)瘟热病毒, 犬(Distemper Virus, Canine)基因(Genes)性(Sex)免疫(Immunity)

分类号 S852.65

栏目名称 研究报告

DOI 10.3969/j.issn.1671-8135.2008.07.012

发布时间 2008-09-23

基金项目

国家质检总局资助项目

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2008年28卷7期

53-57页

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