纳米磁性壳聚糖微球固定化酵母醇脱氢酶的研究
Study of Immobilization of Yeast Alcohol Dehydrogenase Cross-linked Magnetic Chitosan Microspheres
摘要建立了以纳米级磁性壳聚糖微球(magnetic chitosan microsplaeres,M-Cs)为载体固定化酵母醇脱氢酶(yeast alcohol dehydrogenase,YADH)的方法,优化了YADH的固定化条件,考察了固定化酶的性质.结果 表明,M-CS呈规则的圆球形,粒径在30nm左右,具有较好的磁响应性.酵母醇脱氢酶固定化适宜条件为:50 mg磁性壳聚糖微球,加入20ml 0.25mg/ml酵母醇脱氢酶(蛋白质含量)磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L,pH 7.0),在4℃固定2h.M-CS容易吸附酵母醇脱氢酶,但吸附的酶量受载体与酶的比例、溶液的离子浓度、溶液pH的影响明显,而温度对吸附的酶量的影响则相对较弱.相对于游离的酵母醇脱氢酶,固定化酶的最适温度略有升高,可明显改善其热稳定性、酸碱稳定性、操作稳定性和贮存稳定性.
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