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重组毕赤酵母发酵牛肉风味肽的中试研究

Pilot-scale Fermentation of Recombinant Pichia pastoris for Beefy Meaty Peptide

摘要研究分泌表达16拷贝牛肉风味肽(beefy meaty peptide, BMP)毕赤酵母工程菌株(Pichia pastoris GS115-16B2)的500L发酵罐中试发酵工艺.在500L发酵罐中采用三步发酵法进行了3批次中试发酵实验,设定菌体培养阶段温度为30℃,pH5.0,诱导表达阶段温度为28℃,pH3.0.在发酵过程中通过调节搅拌速度、通气量和罐压等措施来使DO维持在20%~35%左右,总共发酵126h(诱导时间为96h),当诱导88h后(发酵118h),600nm波长下的光密度值(OD600)达到184.5,菌体湿重达到318.7g/L,目的产物BMP的表达量达到最高为172 mg/L,实现了BMP的高效表达.通过中试发酵初步建立了工程菌P. pastoris GS115-16B2的中试发酵工艺,为BMP的进一步研究开发奠定了良好基础.

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