换一批高亲和力莱克多巴胺单克隆抗体的研制及ciELISA检测方法的建立
Generation of High Affinity Monoclonal Antibody and Development of ciELISA Kit for Rapid Detection of Ractopamine
摘要用混合酸酐法(MA)将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用UV和SDS-PAGE鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/c小鼠,细胞融合技术建立高亲和力RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb;应用RAC mAb研制RAC残留快速检测ciELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5:1;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol;RAC-Kit的检测限为0.5ng/ml,检测范围为0.5～151ng/ml,饲料样、猪尿样的平均添加回收率为87.2%,89.4%,平均批内和批间变异系数小于15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR%)为9.7%,与其它化合物无CR,RAC-Kit在4℃保存期为180d.
更多相关知识
医学主题词
多巴胺(Dopamine)抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)抗原(Antigens)指示剂和试剂(Indicators and Reagents)方法(Methods)
分类号
Q819（生物工程应用）
栏目名称
发布时间
2009-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家科技支撑计划重大项目（(2006BAKO21/1)）
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