换一批
换一批化学发光Southern blot法检测HBV体外复制及其应用于药物对HBV的抑制分析
Chemiluminescent Southern blot System for Detection of HBV Replication in vitro and Its Application for Analysis the Drugs Inhibition to HBV
摘要目的:建立化学发光Southern blot检测细胞内HBV DNA的方法,同时检测3种不同靶点抗乙肝药物的体外作用.方法:用地高辛标记HBV探针,优化杂交条件,检测来自HepG2及HepG2.2.15 HBV DNA复制中间体;利用建立的化学发光Southern blot检测HBV DNA的方法检测经拉米夫定、Bay41-4109、α-Galcer以不同药物浓度处理的HepG2.2.15HBV DNA复制中间体的水平.结果:(1)标记的HBV探针的检测灵敏度为0.1pg,杂交系统的检测灵敏度为1pg,可检测到HepG2.2.15细胞内的HBV DNA特异性信号;(2)以该法检测胞内HBV DNA可见3种药物都有明显的抑制作用,其半数有效量(IC50)分别为1.53μmol/L、0.41μmol/L、0.01μmol/L.结论:胞质HBV DNA的水平能准确地反映不同靶点抗HBV药物的抗病毒效果,建议在观察药物特别是中药抗病毒研究中采用.
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主题词
复制技术(Copying Processes)药用制剂(Pharmaceutical Preparations)发光(Luminescence)细胞(Cells)拉米夫定(Lamivudine)
分类号
Q819
栏目名称
技术与方法
发布时间
2009-06-05
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