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    首页 > 中国生物工程杂志 > 兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除

    兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除

    Gene Knocking Out of Hyaluronidase in Streptococcus zoopidemics

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    摘要以透明质酸分解酶基因(Hyl)为改造目标,利用同源重组技术获得Hyl基因敲除的重组菌.首先以兽疫链球菌的基因组DNA为模板扩增出部分透明质酸分解酶基因(Hyl-1),然后将其克隆到载体pMD19-T上,再以质粒puc19为模板,PCR扩增得到氨苄青霉素抗性基因,通过反向PCR将其插入月Hly-1基因的中部,得到基因敲除载体pMD19T-SA.该载体与质粒pBR322分别用EcoR Ⅰ、PstⅠ双酶切后进行连接,得到基因敲除的重组载体pBR322-SA,PCR及限制性酶切分析,构建的敲除载体与设计结果相符.最后,利用这两种敲除载体通过同源重组技术得到一株重组菌,经PCR及酶活鉴定,这株菌的Hyl基因已缺失.

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    作者 崔亚娜 [1] 苏旭东 [1] 王羽 [1] 马晓燕 [1] 王雪静 [1] 林杨 [1] 张伟 [1] 学术成果认领
    作者单位 河北农业大学食品科技学院,保定,071001 [1]
    关键词 兽疫链球菌Hyl基因反向PCR基因敲除载体重组菌Streptococcus zoopidemicsHyl geneReverse PCRGene knockout vectorRecombinant
    主题词 基因(Genes)马链球菌(Streptococcus equi)透明质酸(Hyaluronic Acid)同源重组(Homologous Recombination)质粒(Plasmids)
    分类号 Q784
    栏目名称
    技术与方法
    发布时间 2010-03-12
    • 浏览167
    • 被引8
    • 下载0
    中国生物工程杂志

    中国生物工程杂志

    2009年29卷12期

    94-99页

    ISTICPKUCSCDCA

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