一种基于PCR技术鉴定单拷贝转基因烟草的方法
A Simple and Rapid PCR-based Method for Identifying Transgenic Tobacco Plants Carrying a Single Copy of the Integrated Gene
摘要为了鉴定携带单拷贝外源基因的转基因烟草植株,以烟草核基因组上已知的单拷贝内源基因(RNR_2)为内参,转基因烟草植株基因组DNA为模板,在同一PCR反应体系中扩增内源基因(RNR_2)和外源目的基因(NPTⅡ).反应产物在琼脂糖凝胶上电泳,获得了预期大小的两条特异性扩增条带.经ImageJ软件捕捉分析两条目的条带的灰度比,当T_1代转基因烟草植株中外源基因与内源基因的扩增条带灰度比为1时,所检测植株即为单拷贝外源基因的转基因烟草植株.孟德尔经典遗传学方法证实了上述检测结果高度可信.
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