邻近多位点基因突变的组合大引物PCR策略
A Combinatorial Megaprimer PCR Strategy for Adjacent Multi-site-directed Gene Mutagenesis
摘要报道了一种新的组合多位点突变策略,通过单管中三阶段聚合酶链式反应(PCR)得以实现.在第一阶段,PCR扩增出多位点突变大引物,然后在第二阶段延伸大引物,在第三阶段获得全长突变基因序列.基于退火温度与热循环参数的组合大引物反应的优化,三个阶段中退火温度差异小(低于10℃),成功扩增出多位点突变基因序列和比邻突变序列.是一种简单、高效的多位点突变方法.
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关键词
多位点突变大引物PCR基因工程组合三阶段PCR反应人干扰素αMulti-site mutagenesisMegaprimer PCRGenetic engineeringCombinatorial three-stagePCR reactionHuman interferon α
分类号
Q78
发布时间
2010-10-18
基金项目
高等学校博士学科点专项科研基金
天津市自然科学基金
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