换一批低温沼气发酵微生物区系的筛选及其宏基因组文库构建
Screening of Microbial Community in Biogas Fermentation under Low Temperature and Construction of its Metagenome Library
摘要从四川、浙江、山西、北京等地采集冬季产气良好户用沼气池及沼气工程中的沼液样品作为微生物接种源,在实验室条件下进行了500ml反应器的梯度降温模拟沼气发酵试验,筛选出5个在21℃、18℃和15℃等不同温度下均可正常产气的沼液样品Z-2、Z-3、Z-15、Z-8和Z-10,选取其中3个产气量较高的沼液样品Z-3、Z-6和Z-10作为接种源,进一步建立了2 500ml反应器实验室模拟15℃低温沼气发酵系统,经过连续传代筛选获得一个在15℃低温下产气量较高且稳定的沼气发酵系统Z-6,产气率达到0.15m3/m3d.提取该系统内沼气发酵微生物宏基因组DNA,以pBluescript SK(+)质粒为载体成功构建了约10 000个克隆的沼气发酵微生物宏基因组质粒文库.随机分析文库中的克隆结果表明,该文库的外源片段平均长度约为5kb,文库总容量为48Mb,插入片段带型多样性较高.该文库的建立为沼气发酵过程中水解酶基因资源的挖掘利用奠定了基础.
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