甲基营养菌Methylobacterium sp.MB200中部分一碳代谢相关基因的定位及 mtdA 和 mtdB基因的克隆研究
Location of Some Genes Related to One Carbon Metabolism in Methylobacterium sp.MB200 and Cloning of mtdA and mtdB Genes
摘要以甲基营养细菌Methylobacterium sp.MB200为出发菌株,首先利用质粒转座子(pTnModRKm')构建了目的菌株MB200的部分突变体库,获得能够在双抗性MMII板上生长的突变体共11552株,然后在双抗性MMI板上复筛获得不能够利用甲醇的突变体333株(初步认为是一碳代谢途径被破坏的突变株),为一碳代谢相关基因的克隆研究奠定了基础.随后利用TAIL-PCR技术快速准确地从突变体库中定位了部分与一碳代谢相关的基因,并根据pTnMod-RKm'具有复制起始位点能够快速克隆插入位点侧翼序列的特性克隆到mtdA和mtdB基因的全序列并进行了初步分析.
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