换一批
换一批肺炎链球菌去信号肽脂蛋白PsaA锌离子结合特性的初步表征
Preliminary Characterization of a Streptococcus pneumoniae Lipoprotein PsaA Without Signal Peptides for Zinc-binding Properties
摘要肺炎链球菌是细菌性肺炎的主要病原体.PsaA是各种肺炎链球菌共有的遗传保守的特异性表面金属结合脂蛋白.通过PCR扩增肺炎链球菌D39不舍信号肽的PsaA基因片段,将其通过T4连接酶连接至含6His标签的表达载体PBAD/HisA中,转化表达宿主大肠杆菌Top-10后用L(+)-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达.重组蛋白经亲和镍柱纯化以后,用外切酶-重组肠激酶(REK)去除6His标签.感应偶合电浆质谱(ICP-MS)测得纯化的PsaA蛋白以1∶1比例结合金属锌离子.进而,通过圆二色谱法分析金属离子的结合对蛋白二级结构中α-螺旋和β-片层含量的影响,荧光光谱研究蛋白结合锌离子的解离常数及结合当量,为进一步研究该蛋白在体外的金属结合特性及细菌的金属运输及毒力机制提供理论基础.
更多相关知识
- 浏览184
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
