布鲁氏菌B.ovis virB缺失株的构建及胞内环境适应性分析

Construction of B.ovis virB Mutant and Analysis the Intracellular Environmental Adaptations

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摘要目的:利用基于T载体快速克隆构建布鲁氏菌突变株的方法,构建缺失VirB启动子区域的绵羊附睾布鲁氏菌株,为绵羊附睾种布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统功能研究奠定基础.方法:运用同源重组的原理,用Kana抗性基因替换编码分泌系统VirB的启动子区域,从而获得virB的突变株.通过RT-PCR对突变株virB基因的转录进行了分析；分析突变株和野生株在体外模拟的胞内环境下的生存能力,观察virB对B.ovis胞内生存环境适应的影响.结果:成功构建了B.ovis的缺失virB启动子区的突变株,突变株中virB基因的表达抑制.与野生株相比,突变株对胞内环境的适应力发生了改变.结论:利用T载体克隆和抗性替换的方法成功构建了B.ovis的virB的突变株,为B.ovis的Ⅳ型分泌系统的功能研究奠定了基础.

作者高光俊 ^[1] 柯跃华 ^[2] 徐杰 ^[3] 王丽萍 ^[1] 张正芳 ^[1] 李卓琳 ^[4] 王璐璐 ^[4] 郭英飞 ^[4] 王玉飞 ^[4] 徐兴然 ^[2] 陈泽良 ^[4] 学术成果认领

作者单位西南大学药学院重庆400716;军事医学科学院疾病预防控制所北京100071 ^[1] 西南大学药学院重庆400716 ^[2] 军事医学科学院疾病预防控制所北京100071;吉林大学公共卫生学院医学基因组学研究中心长春130021 ^[3] 军事医学科学院疾病预防控制所北京100071 ^[4]

关键词布鲁氏菌 virB 突变株 T4SS 胞内环境适应

主题词突变(Mutation)绵羊(Sheep)性(Sex)方法(Methods)基因(Genes)

分类号 Q813.1

栏目名称 技术与方法

发布时间 2013-03-15

基金项目

国家自然科学基金 国家"十一五"科技重大专项 国家"973"计划