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利用BglBrick方法进行HSA/Exendin-4长效融合蛋白的快速组装

Rapid Assembly of Long-term HSA/Exendin 4 Fusion Protein via BglBrick Method

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摘要目的:通过合成生物学的BglBrick方法快速构建不同种类HSA/ Exendin-4长效融合蛋白,为进行各HSA/Exendin-4融合蛋白生物学活性的筛选比较奠定基础.方法:选用酵母表达载体pPICZαA质粒,构建pPICZαA-E4和pPICZαA-HSA两种基础Brick表达载体,运用BglBrick方法,实现了不同数目Exendin-4分子在HSA的不同末端的快速组装.将构建出的10种HSA/Exendin-4融合蛋白,转入毕赤酵母菌KM71H中,用甲醇诱导目的蛋白的表达.结果:用BglBrick方法构建的HSA/Exendin-4融合蛋白在毕赤酵母中都成功诱导表达出相应的目的蛋白.结论:利用BglBrick方法能够实现HSA长效融合蛋白的快速组装.

作者邵妤 ^[1] 曲国龙 ^[2] 金晶 ^[3] 王微 ^[4] 谭俊杰 ^[2] 阚乃鹏 ^[1] 李玉霞 ^[2] 刘刚 ^[2] 陈惠鹏 ^[2] 学术成果认领

作者单位安徽大学生命科学学院合肥230601;军事医学科学院生物工程研究所北京100071 ^[1] 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 ^[2] 军事医学科学院生物工程研究所北京100071;沈阳药科大学沈阳110016 ^[3] 军事医学科学院生物工程研究所北京100071;吉林大学长春130012 ^[4]

关键词 BglBrick Exendin-4 HSA融合蛋白合成生物学 BglBrick Exendin-4 HSA fusion protein Synthetic biology

医学主题词蛋白(Egg White)方法(Methods)合成生物学(Synthetic Biology)目的(Goals)毕赤酵母(Pichia)

分类号 Q786（分子生物学基因工程《遗传工程》）

栏目名称

技术与方法

DOI 10.13523/j.cb.20140410

发布时间 2014-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）