换一批碳阻遏因子CRE对匍枝根霉产纤维素酶调控作用的研究
The Role of Carbon Metabolism Repressor CRE in the Regulation of Cellulase Produced by Rhizopus stolonifer
摘要为研究匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)TP-02中碳代谢阻遏因子CRE对其产纤维素酶的调控特性,从其基因组DNA中扩增得到CRE全长基因,并利用重叠PCR(overlapping PCR)技术将潮霉素B抗性基因(hygB)插入其中,既破坏cre正常转录又提供了筛选标记.通过电转化将pUCm-T-cre-hygB导入匍枝根霉萌发孢子,经抗性筛选得到△CRE突变株.利用RT-qPCR对此突变株纤维素酶基因转录水平进行研究,发现eg、bg、cbh1和cbh2的转录均有所提高,分别为48.75％、26％、5.6％和38.6％.同时,△CRE突变株的纤维素酶在表达水平上也均高于原菌,其中内切葡聚糖苷酶酶活提高了58.62％.CRE的破坏在一定程度上减弱了碳阻遏效应,其对纤维素酶的调控具有特异性.其中,对内切酶的调控最为显著.此外,△CRE突变株在3％糖浓度下仍高产纤维素酶,这为后续酶系优化及产业化生产提供了一定的依据.
更多相关知识
关键词
碳阻遏因子纤维素酶匍枝根霉转录调控Carbon metabolism repressorCellulasesRhizopus stoloniferTranscriptional regulation
栏目名称
DOI
10.13523/j.cb.20160305
发布时间
2016-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31270135）
- 浏览164
- 被引2
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
