PEI-壳聚糖在结肠癌细胞CD133+梯度表达的转染研究
Transfection Efficiency Using PEI-CP Complex for CD133+ Differently Expressed by Colon Cancer Lines
摘要目的:以PEI-壳聚糖(CP)为载体材料,考察CD133+呈梯度表达的4种结肠癌细胞上的转染效率,将特异性结合CD133的TR多肽修饰CP材料,探讨材料与转染的关系.方法:根据CD133+含量将细胞分为高表达组和低表达组,合成法制备CP材料,激光粒度仪测定纳米粒粒径、电位,CCK8实验检测细胞毒性,用质粒pGL3和EGFP考察CP材料的转染效果,Western印记检测CD133+蛋白的表达.结果:CD133+高表达组SW480、HCT116的CD133+含量为96.97%、92.96%,低表达组CaCO2、SW620的CD133+含量为2.00%、0.56%;CCK8结果得出,CP材料按质量比N/P=5时,生物安全性较高;质粒pGL3转染高表达组,其CD133+ RLU值低于低表达组;质粒EGFP转染高表达组,绿色荧光弱于低表达组,Western blot检测接TR肽的CP材料CD133+表达高于CP材料.结论:CP材料在低表达CD133+组转染效率高,且接TR肽的CP材料针对CD133+有可能介导材料进入细胞.
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