换一批Cas9蛋白对亲骨转移人乳腺癌细胞株生物学性质和超微结构的影响
Effect of Cas9 Protein on Biological and Ultrastructural Characteristics of the Human Bone-seeking Breast Cancer Cell Line
摘要目的:构建表达Cas9蛋白的亲骨转移人乳腺癌细胞株,并研究Cas9蛋白的表达对细胞生物学性质和超微结构的影响,为利用CRISPR/Cas9技术研究乳腺癌骨转移分子机制提供实验基础.方法:通过慢病毒载体介导Cas9蛋白基因转染亲骨转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO,通过G418筛选转染细胞,采用流式细胞术、Western blot、免疫细胞化学验证Cas9基因转染是否成功;运用实时无标记动态细胞分析技术和细胞划痕实验检测Cas9蛋白表达对细胞增殖及迁移的影响;透射电镜观察Cas9蛋白表达对细胞超微结构的影响.结果:成功构建稳定表达Cas9蛋白的亲骨转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 BO-Cas9,Cas9蛋白的表达对细胞的增殖、迁移和超微结构无明显影响.结论:MDA-MB-231BO-Cas9细胞可用于CRISPR/Cas9技术进一步研究.
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关键词
Cas9蛋白亲骨转移人乳腺癌细胞实时无标记动态细胞分析透射电镜Cas9 proteinHuman bone-seeking breast cancer cellReal time cellular analysisTransmission electron microscope
分类号
Q813（细胞工程）
栏目名称
DOI
10.13523/j.cb.20160701
发布时间
2016-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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