换一批
换一批小鼠c-Myc基因的克隆表达及其纯化
Constructing Mouse pET3C-Myc Vector and Its Expression in Rosetta(DE3) and Its Purification
摘要目的:克隆小鼠c-Myc基因,构建原核表达载体并对其进行蛋白表达及纯化.方法:以TetO-FUW-OSKM质粒为模板经PCR扩增c-Myc基因,再通过基因重组技术与pET-3C载体相连转化大肠杆菌DH5α.经抗性筛选,PCR鉴定阳性重组子,测序正确后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定分析.结果:DNA电泳结果证实PCR扩增产物与预期大小一致,DNA测序结果显示与GenBank公布的c-Myc基因序列一致,IPTG诱导SDS-PAGE电泳后,在分子量64kDa左右出现诱导后蛋白新增条带,与预测的c-Myc分子量大小一致.结论:成功地构建了pET3C-Myc原核表达载体,表达并纯化出了c-Myc蛋白,为今后研究c-Myc蛋白及相关蛋白诱导体细胞成多能干细胞打下基础.
更多相关知识
分类号
Q789
栏目名称
研究报告
DOI
10.13523/j.cb.20170204
发布时间
2017-04-14
基金项目
广东省自然科学基金
广东省省级科技计划项目
东莞市社会科技发展项目
浙江省自然科学基金
- 浏览80
- 被引4
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
