换一批
换一批乙肝核心抗原病毒样颗粒呈现HPV 16L1抗原表位及特异抗体诱导
Presentation of HPV 16L1 Peptide-based HBcAg Virus-like Particle and Induction of Specific Antibody
摘要目的:构建呈现HPV 16L1抗原表位的病毒样颗粒(VLPs),为新型HPV疫苗及特异抗体制备提供新的思路.方法:将编码HPV 16L1抗原表位QPLGVGISGHPLLNKLDDTE寡聚核苷酸片段克隆于HBcAg基因编码第78、79位氨基酸序列之间,重组质粒转化大肠杆菌DH5α.重组蛋白经IPTG诱导后以SDS-PAGE分析表达情况,并以Western blot鉴定重组蛋白中HPV 16L1表位的免疫反应性.菌体超声破碎后经硫酸铵盐析法和蔗糖密度梯度离心进行纯化,并经凝胶层析Sepharose G25脱盐,最后以电子显微镜及高效液相(HPLC)凝胶过滤色谱鉴定VLPs的存在并分析纯度.纯化的病毒样颗粒分别于0周、2周、4周经皮下注射免疫BALB/c小鼠,以Western blot分析血清特异识别L1蛋白的能力.结果:HBcAg/L1肽嵌合蛋白获得成功表达,能够被商业化L1抗体特异识别,经密度梯度超速离心及HPLC分析显示其与HBcAg行为一致,电子显微镜观察进一步确定其以HBcAg病毒样颗粒形式存在.VLPs免疫小鼠获得的抗血清能够特异识别酵母表达的重组L1蛋白.结论:HBcAg VLPs成功呈现HPV16L1蛋白并有效激发特异抗体应答.
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关键词
人乳头瘤病毒表位乙肝核心抗原病毒样颗粒原核表达Human papillomavirus(HPV)Antigenic epitopeHepatitis B virus core antigen (HBcAg)Virus like particle(VLP)Prokaryotic expression
分类号
Q816
栏目名称
技术与方法
DOI
10.13523/j.cb.20170308
发布时间
2017-05-04
基金项目
云南省对外科技合作计划项目
云南省应用基础研究计划重点项目
云南省应用基础研究面上项目
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