换一批
换一批共表达构建呈现人白细胞介素-13抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒
Co-expression Construction of Qβ Phage Virus-like Particles Presenting Human Interleukin-13 Antigenic Peptide
摘要目的:构建呈现人白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗.方法:将人IL-13抗原肽经基因重组插入Qβ噬菌体衣壳蛋白(CP)的C端.在BL21细菌中,经IPTG诱导CP及C端接有IL-13抗原肽的CP(CP/IL-13)同时表达.以硫酸铵沉淀及蔗糖密度梯度离心进行VLPs纯化及分析嵌合VLPs的存在,以HPLC分析VLPs纯度,以电镜观察颗粒形态.小鼠经皮下免疫VLPs后采集血清,以ELISA检测人IL-13特异性IgG抗体水平.结果:重组蛋白CP与CP/IL-13获得成功表达,两者在密度梯度离心中有一致的、与QβVLPs相同的沉降行为,而CP/IL-13单独无Qβ颗粒行为.经纯化获得了高纯度颗粒,嵌合颗粒与Qβ颗粒形态相似.此外,该VLPs疫苗诱导小鼠产生了IL-13特异的抗体应答.结论:利用共表达策略可成功构建呈现人IL-13抗原表位的嵌合VLPs,为以主动免疫方式调控IL-13在疾病中的病理作用,提供了具有临床应用潜能的疫苗形式.
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