通过失活Sec途径阻遏蛋白和胞外蛋白酶提高地衣芽孢杆菌产碱性蛋白酶的能力
Improving the Ability of Bacillus licheniformis to Produce Alkaline Protease by Inactivating Sec Pathway Repressor Protein and Extracellular Proteases
摘要为了探究Sec分泌途径对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)碱性蛋白酶产量的影响,对地衣芽孢杆菌TCCC11470(BL △upp △eps △pgs)中的分子伴侣阻遏蛋白基因hrcA和基因组中3个Sec途径分泌的胞外蛋白酶基因epr、bpr和vpr进行叠加敲除.通过对比分析基因缺失前后的碱性蛋白酶酶活力发现,敲除菌株TCCC11470△hrcA和TCCC1 1470△hrcA△epr△bpr△vpr在42 h的碱性蛋白酶酶活力分别达到18 521.2 U/mL和20 048.5 U/mL,分别高出对照菌株BL△upp△eps△pgs(14 478.6 U/mL)27.9%和38.5%.这一结果指出,通过改进Sec分泌通路可以显著提升碱性蛋白酶的催化效能,为构建优化的工业酶生产宿主提供了新思路和研究方向.
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