基于CRISPR-Cas系统的RNA m6A编辑工具的檪研究进展
Research Progress of RNA m6A Editing Tools Based on the CRISPR-Cas System
摘要N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是动物mRNA内部最普遍的修饰,能够通过甲基化酶和去甲基化酶进行动态调节.靶向编辑RNA m6A修饰对于研究特定m6A位点的功能,阐明特定m6A存在与表型结果之间的关系以及通过靶向m6A开发分子疗法至关重要.规律成簇的间隔短回文重复序列系统及相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein,CRISPR-Cas)系统具有高效性、易操作性和良好的靶向精确性,被广泛用于基因编辑,特别是通过利用m6A甲基化酶和去甲基化酶与Cas9/Cas13 失活变体融合,已开发了一系列基于CRISPR-Cas系统的RNA m6A编辑工具,并成功应用于哺乳动物细胞、干细胞及植物中,有助于揭示m6A在基因表达、病毒感染和发育调控等方面的功能.总结不同类型m6A编辑工具的系统构建、PAM/PFS(protospacer adjacent motif/protospacer flanking sequence)要求、脱靶效应和编辑窗口,并讨论各类工具的优缺点和应用前景,为m6A编辑工具的进一步发展和应用提供参考.
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