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大肠杆菌原核增强子样序列的克隆及其结构与功能的研究

Functional and Structural Analysis of A Prokaryotic Enhancer-like Element in Escherichia coli MC1061 Strain

摘要利用氯霉素乙酰转移酶(cat)以及β-半乳糖苷酶(1acz)基因作为报告基因,从大肠杆菌MC1061株染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列-MC2,MC8,MC9,这3个片段均具有正反向增强活性,对β-半乳糖苷酶基因的增强活性(正向)在2~5.5倍之间.采用体内转录,RNA Dot blot杂交的方法对MC8的功能进行了研究,结果表明,MC8片段对于基因表达的调控发生在转录水平上.用核酸外切酶III末端缺失的方法对MC8的功能区进行了定位.结果显示,MO8的功能区位于距其正向克隆5'端450~950bp长约500bp的区段内.在450~600bp以及840~950bp区段内至少分别含有一个功能位点.序列分析的结果表明,MC8功能区有3个AT丰富区,其中2个分别位于450~600bp以及840~950bp区段内.

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生物工程学报

生物工程学报

2000年16卷1期

27-30页

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