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首页 > 生物工程学报 > 截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究

截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究

Carboxyl Terminus Truncated HPV58 Virus L1 Protein Expressed with Baculovirus System and its Bioactivity

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学术成果认领

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摘要利用PCR技术克隆截短型HPV58 L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac-Htb,通过转座反应,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组,分离重组的Bacmid DNA, 并转染Sf-9昆虫细胞,收集被转染的Sf-9细胞,提取细胞蛋白,SDS-PAGE检测可见在大约58Kda处出现一新生蛋白条带,Western blot 证实为HPV58L1蛋白.用ProBondTM纯化系统纯化所表达的蛋白.小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集,透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP.结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV58L1蛋白,纯化后的截短型HPV58 L1蛋白在体外可自组装VLP,并具有介导小鼠红细胞凝集的生物学活性.

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作者李文生 ^[1] 郑瑾 ^[2] 刘红莉 ^[2] 陈宏伟 ^[2] 杨军 ^[2] 王一理 ^[2] 司履生 ^[2] 学术成果认领

作者单位西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,710061;西安交通大学陕西临床学院,西安,710068 ^[1] 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,710061 ^[2]

关键词截短型HPV58 L1蛋白,昆虫-杆状病毒表达系统,蛋白纯化,病毒样颗粒

主题词蛋白(Egg White)病毒(Viruses)昆虫(Insects)乳, 人(Milk, Human)肿瘤(Neoplasms)

分类号 Q786

栏目名称 基因工程

DOI 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.04.012

发布时间 2004-08-18

基金项目

国家自然科学基金

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2004年20卷4期

536-539页

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