换一批金属螯合亲和层析纯化和复性重组人铜锌超氧化物歧化酶
Purification and Renaturation of Recombinant Human Cu, Zn-SOD by Metal-Chelating Affinity Chromatography
摘要将重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCu,Zn-SOD)包含体(经纯化后纯度达80%以上)以稀释法或透析法初步复性后,分别再经金属螯合亲和层析(MCAC)纯化.结果透析复性样品和稀释复性样品经MCAC纯化后的rhSOD比活是各自上柱前样品比活的2.2倍和5.3倍,蛋白回收率分别为64%和25%,同时两者活性回收率皆大于130%.表明目标蛋白rhSOD在经过MCAC纯化的同时又获得进一步复性.SDS-PAGE显示rhSOD为19kD的单一条带,纯度大于95%,比活达到5000u/mg左右,同时NBT生物活性染色鉴定显示出很强的超氧化物歧化酶活性.表明MCAC对于复性不完全的rhCu,Zn-SOD而言是一种纯化和使其进一步复性的简便省时且有效的方法.该方法为以包含体形式表达的基因重组蛋白的纯化和复性提供了新思路.
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分类号
Q55（酶）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.025
发布时间
2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河北省生物工程重点学科资助项目（(200500021)）
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