换一批青花菜雄性不育相关基因BoDHAR的克隆与表达分析
Gene Cloning and Expression Analysis of a Male Sterility Related Gene BoDHAR from Broccoli
摘要以一个与甘蓝显性核不育相关的差异表达片段的序列为信息探针,通过在NCBI与TAIR网站数据库中进行同源EST序列搜索,经人工拼接、RT-PCR、PCR克隆与序列分析,获得了青花菜脱氢抗坏血酸还原酶DHAR dehydroascorbate reductase基因的cDNA与DNA全长序列,命名为BoDHAR.并利用双链接头介导PCR的染色体步行技术(genome walking)克隆了其上游644bp的5'端序列.所获的BoDHAR基因全长1486bp,存在两个内含子,DNA编码区序列633bp,编码210个氨基酸;序列分析表明:BoDHAR与同源基因AT1G19570.1 cDNA序列有82.3%的一致性,推导的氨基酸序列有79.6%的一致性;编码的水溶性蛋白存在多个磷酸化位点;5'端上游区存在明显的转录调控序列.半定量RT-PCR结果表明:BoDHAR在可育系花蕾中的表达量明显高于不育系花蕾,在花药中的表达明显高于其它部位.
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DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2006.05.010
发布时间
2006-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30370981）
农业部重点实验室基金（30400298）
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