换一批米曲霉果胶酸酯裂解酶(pectin lyase 1)在原核系统中重组表达
Expression of Pectin Lyase 1 from Aspergillus oryzae in Escherichia coli
摘要来自米曲霉(Aspergillus oryzae)和黑曲霉(Aspergillus niger)的果胶酸酯裂解酶(pectin lyase)一直被用于传统发酵食品的生产,但自然条件下A.oryzae和A.niger的果胶酸酯裂解酶产量较低.通过RT-PCR的方法,获得不含信号肽的A.oryzae Pel1 cDNA,将Pel1 cDNA连入pET-28a(+)载体,构建pET-28a(+)-pel1质粒.pET-28a(+)-pel1转化Turner(DE3)placⅠ细胞,得到转化子pET-28a(+)-pel1-Turner(DE3)placⅠ,表达与6个组氨酸融合的Pel1.进一步对Pel1在E.coli系统中表达的条件进行了研究,在37℃,220 r/min条件下,培养pET-28a(+)-pel1-Turner(DE3)placⅠ细胞,当OD600至0.8左右时,用500 μmol/Lisopropyl βD-thiogalactogalactop-yranoside(IPTG)进行诱导表达,在15℃和170r/min条件下,继续培养60h后,表达效果最好,产酶可达到400u/mL,是A.oryzae自然条件下产酶量的4000倍,也高于已报道的真菌果胶酸酯裂解酶在真菌体系中重组表达的效果.
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分类号
Q55（酶）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2007.05.020
发布时间
2007-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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