条斑紫菜R-藻红蛋白荧光探针制备条件优化
Optimization of Fluorescence Probe Preparation for R-Phycoerythrin in Porphyra yezoensis
摘要通过化学方法使条斑紫菜R-藻红蛋白与抗体进行交联以制备荧光探针,并对制备条件进行优化.首先采用异双功能试剂SPDP(N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫丙酸醇)和DTT(二硫苏糖醇)分别使R-PE(R-藻红蛋白)衍生化、IgG(单克隆抗体)巯基化,其次测定了SPDP与R-PE不同摩尔比对R-PE衍生化的影响、DTT与IgG不同摩尔比对IgG巯基化的影响,结果表明:SPDP与R-PE的最佳摩尔比为40:1,DTT与IgG的最佳摩尔比为500:1.在此基础上,建立了R-PE与IgG交联的制备技术.并应用全波长扫描吸收光谱、电泳分析和荧光显微镜观察等监测和分析技术,证实了藻红蛋白与抗体已成功交联形成了复合物.
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