换一批摘要构建人Sef-L 和 Sef-S 基因的复制缺陷型重组腺病毒表达载体,为研究 Sef 的功能和作用机制以及Sef的基因治疗奠定基础.通过PCR方法以hSef的表达质粒为模板扩增得到hSef的编码序列,亚克隆到穿梭载体 pAdTrack-CMV中,经测序验证之后,将穿梭载体使用 Pme Ⅰ酶切线性化,然后与腺病毒基因组质粒 pAdEasy-1 共转化大肠杆菌 BJ5183,得到重组的 Ad-hSef-L 和 Ad-hSef-S 质粒,最后将 Ad-hSef-L 和 Ad-hSef-S 质粒使用 Pac Ⅰ线性化,转染到 HEK293 细胞中,包装收获病毒颗粒,免疫印迹实验鉴定表达,荧光素酶报告实验验证其功能.成功构建了人 Sef 基因的复制缺陷型重组腺病毒表达载体,获得了有功能的 Ad-hSef-L 和 Ad-hSef-S 病毒重组子.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2008.02.005
发布时间
2008-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览251
- 被引2
- 下载8
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
