共表达PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的"自杀性"DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答

Immune Responses Induced by the Suicidal DNA Vaccines Co-expressing the GP5 Protein of PRRSV and the E2 Protein of CSFV in Mice

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摘要为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratorysyndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS-E2中.为了增强免疫效果,在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位(PADRE),在CSFV E2基因后融合伪狂犬病病毒(PrV)UL49基因,获得了6种重组质粒.间接免疫荧光试验显示,PRRSV GP5和CSFV E2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达,将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测血清抗体水平,通过基于CSFE/WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫.结果显示,除pSFV1CS组外,从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体;各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖:部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组.结果表明,这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫,PrV UL49可以增强其细胞免疫应答.

作者 仇华吉 ^[1] 孙建富 ^[2] 赵和平 ^[3] 李娜 ^[3] 孙元 ^[3] 夏照和 ^[3] 周艳君 ^[3] 王煜 ^[3] 祁巧芬 ^[4] 鲁承 ^[3] 学术成果认领

作者单位 ^[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,哈尔滨150001;延边大学农学院动物医学系,龙井133400 ^[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,哈尔滨150001 ^[3] 延边大学农学院动物医学系,龙井,133400 ^[4]

关键词 "自杀性"DNA疫苗猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒泛DR表位 VP22转导蛋白共表达

主题词疫苗(Vaccines)蛋白(Egg White)自杀(Suicide)性(Sex)小鼠(Mice)

分类号 Q7

栏目名称 基因工程

DOI 10.3321/j.issn:1000-3061.2008.10.006

发布时间 2008-12-16

基金项目

国家高技术研究发展计划(863计划)