换一批
换一批抗ErbB2嵌合抗体chA21聚集现象的鉴定和分析
Characterization and Analysis of the Aggregation of a Single-chain Chimeric Anti-ErbB2 Antibody
摘要聚集现象是目前基因重组抗体面临的挑战之一.采用高效排阻色谱(HPSEC)、动态光散射(DLS)、SDS-PAGE和间接ELISA鉴定抗ErbB2嵌合抗体chA21聚集的形式和性质,并比较温度和添加剂对抗体聚集程度,抗原结合活性的影响,用圆二色谱(CD)检测不同聚集条件下蛋白构象的变化,最后将抗体酶解分离分析聚集的部位.结果表明:chA21在溶液中可形成二聚和更高形式的聚集,聚集体是通过非共价键相互作用形成,并仍保留抗原结合活性,聚集程度和活性受温度和添加剂影响,而蛋白质的构象相对稳定,抗体可变区的相互作用可能是引起聚集的主要原因之一.对抗体聚集现象的分析有助于建立稳定的抗体保存条件,并为今后抗体进一步改造提供依据.
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分类号
Q5
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2008.11.011
发布时间
2009-02-18
基金项目
国家自然科学基金（30570362）；
教育部高等学校博士学科点专项科研基金（20060358021）；
国家高技术研究发展计划(863计划)子课题（2006AA02A245）；
高等学校科技创新工程重大项目培育资金资助项目（706035）
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