多杀菌素生产菌原生质体的制备条件及其再生菌株生理特性

Conditions for protoplast preparation of spinosyn-producing strain and the physiological properties of protoplast-regenerated strains

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摘要为了改良多杀菌素生产菌种,提高多杀菌素产量,研究了甘氨酸添加浓度、溶菌酶作用时间、温度和浓度对多杀菌素生产菌刺糖多胞菌Saccharopolyspora spinosa SP06081菌株原生质体制备和再生的影响,并考察了不同再生培养基和渗透压稳定剂对其再生的影响,确定了该菌株原生质体制备和再生的最佳条件.同时,对原生质体再生菌株的形态与多杀菌素产量变化进行了比较研究.结果表明:菌体在添加0.2%的甘氨酸的TSB培养基中培养48 h收集,0.1 mg/mL溶菌酶,28℃作用20min制备原生质体,将原生质体涂布于以蔗糖为渗透压稳定剂的R2YE培养基中,原生质体再生数目最多,达108个/mL以上;原生质体再生菌株在形态和抗生素产量上产生分化,29.3%的再生菌株形态上保持与亲本菌株一致,具有菌丝松散,断裂分枝多的特点,其中53.2%的再生菌株多杀菌素产量变异向正方向移动,最高产量达到582.0 mg/L,比亲本菌株提高85.6%.原生质体再生菌株的形态分化与多杀菌素产量具有重要相关性.