换一批普通小麦中双脱氢抗坏血酸还原酶(TaDHAR)基因的克隆与生化特性分析
Molecular and biochemical analysis of two genes encoding dehydroascorbate reductase in common wheat
摘要利用同源克隆技术从六倍体普通小麦中获得了两个不同的双脱氢抗坏血酸还原酶(TaDHAR)基因的cDNA克隆.器官表达模式分析表明,这两个TaDHAR基因(暂时命名为TaDHAR1和TaDHAR2)在小麦根,茎、叶,幼穗以及开花后10 d、20 d和30 d的种子中均有表达.为组成型表达基因.原生质体表达实验表明,两个基因的产物均可能定位在细胞质中.在细菌中表达并提纯了两个基因的重组蛋白.体外生化测定表明两个重组蛋白均具有将双脱氢抗坏血酸还原成抗坏血酸的能力,其最适pH为7.5,在37℃时的活性比25℃高,但25℃条件下pH 6.0和7.0时,两个DHAR蛋白的活性显著不同.本研究的结果为进一步揭示TaDHAR基因在小麦抗坏血酸代谢中的生理作用奠定了基础.
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关键词
普通小麦双脱氢抗坏血酸还原酶抗坏血酸双脱氢抗坏血酸表达模式酶活common wheatdehydroascorbate reductaseascorbic aciddehydroascorbateexpression patternenzyme activity
分类号
S5
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-3061.2009.10.007
发布时间
2010-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30771306）
南通大学博士科研项目（09B04）
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