口蹄疫病毒前导蛋白(L~(pro))致牛肾细胞(MDBK)作用的形态学观察
Morphological observation of Bovine Kidney (MDBK) cells effected by foot-and-mouth disease virus L~(pro)
摘要为探讨口蹄疫病毒L~(pro)致MDBK细胞病变效应中的形态学变化,本实验在成功构建可稳定表述口蹄疫病毒L~(pro)目的基因的MDBK细胞系的基础上,人工诱导L~(pro)表达后,采用光学显微镜观察、Hoechst 33258染色、AO-EB染色、DNA Ladder等进行检测,研究口蹄疫病毒L~(pro)致MDBK细胞的病变效应.结果显示,MDBK细胞系在诱导表达口蹄疫病毒L~(pro)24 h后,光学显微镜下细胞形态表现为细胞体积缩小、核浓缩、细胞周围出现透明圈等现象:Hoechst 33258染色检测呈现典型的细胞核浓缩和梅花状核碎裂:诱导表达L~(pro)36 h后,AO-EB染色显示早期病变细胞核染亮绿色呈致密斑块或碎片状,晚期病变细胞核染橘黄色呈致密斑块;DNA凝胶电泳显示可见的DNA Ladder"梯状"条带.证明口蹄疫病毒L~(pro)在体外可诱导MDBK细胞发生凋亡.
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