换一批牛病毒性腹泻病毒NS3基因的序列分析、表达与抗原性鉴定
Sequence analysis, expression and antigenicity detection of bovine viral diarrhea virus NS3 gene
摘要本研究应用套式RT-PCR方法扩增出牛病毒性腹泻病毒VEDEVAC株编码NS3蛋白的基因,克隆至表达载体pET-30a(+),并进行测序.对瘟病毒属病毒NS3基因进行氨基酸差异性分析,显示平均P-distance为0.07,系统进化树分析表明VEDEVAC株隶属于BVDV 1型.将构建成功的重组质粒转化大肠埃希氏茵Rosetta(DE3),在IPTG诱导下表达NS3重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化和尿素梯度透析后进行反应原性鉴定.Western blotting结果显示表达的重组蛋白可以与牛病毒性腹泻病毒阳性血清反应,并与猪瘟阳性血清有交叉反应,ELISA结果显示该重组蛋白具有良好的反应原性.所获得的蛋白为建立针对NS3抗体的ELISA检测方法奠定了基础.
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关键词
牛病毒性腹泻病毒NS3蛋白差异性分析进化树抗原性bovine viral diarrhea virusNS3 proteindivergence analysisphylogenetic treeantigenicity
分类号
S8
栏目名称
发布时间
2010-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
现代农业产业技术体系建设专项资金（(NYCYTX-0303)）
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