换一批
换一批中国仓鼠卵巢工程细胞无血清流加培养关键工艺参数的考察
Evaluation of the critical process parameters for the cultivation of recombinant Chinese hamster ovary cells in serum-free fed-batch mode
摘要主要考察流加培养基中不同营养成分、流加起始时间及初始接种密度对11G-S细胞无血清流加培养的影响.在研究中以悬浮适应的表达尿激酶原(Pro-urokinase,Pro-UK)CHO工程细胞系11G-S为研究对象,在100 mL的摇瓶中无血清悬浮流加培养11G-S细胞,同时以活细胞密度、细胞活力及Pro-UK活性为评价依据.结果表明在培养基中氨基酸,无血清添加成分及无机盐对促进细胞生长、细胞活力维持及蛋白表达起着较为重要的作用;且流加起始时间为72 h及初始接种密度为3×105～4×105 cells/mL的流加培养效果较好.在为期12 d的流加培养过程中,11G-S细胞的最大活细胞密度达到7.8×106 cells/mL,Pro-UK的最大累积活性为8 570 IU/mL.在此基础上,分别考察了无血清悬浮流加培养及分批培养11G-S细胞的生长及代谢特征,流加培养中期11G-S细胞的比生长速率(μ)高于同期批次培养的11G-S细胞;流加培养中后期11G-S细胞的葡萄糖比消耗速率(qglu)和谷氨酰胺比消耗速率(ggln)均高于同期批次培养的11G-S细胞.
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