换一批水母雪莲查尔酮合酶基因的克隆、表达及酶活分析
Cloning, expression and charaterization of chalcone synthase from Saussurea medusa
摘要从水母雪莲Saussurea medusa Maxim.cDNA文库中得到一段查尔酮合酶基因(SmCHS)片段,然后通过RT-PCR得到完整的查尔酮合酶基因cDNA.序列分析表明SmCHS全长1 313 bp,其开放阅读框为1 170 bp,编码389个氨基酸,预测表达蛋白的分子量为43 kDa.构建原核表达质粒pET28a(+ )-SmCHS,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株.经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE分析,结果显示,表达的融合蛋白以部分可溶的形式存在.用Ni-NTA预装柱对融合蛋白进行亲和纯化,对纯化蛋白进行酶活检测,结果表明融合蛋白具有查尔酮合酶活性,可催化底物4-香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A缩合生成产物柚皮素查尔酮.
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2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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