换一批
换一批电穿孔介导小干扰RNA高效转染小鼠附植前胚胎
Efficient delivery of siRNA into mouse preimplantation embryos by electroporation
摘要使用Cy3标记的阴性对照小干扰RNA (siRNA)转染小鼠附植前胚胎,建立向小鼠附植前胚胎导入siRNA的电穿孔方法.通过控制透明带弱化程度、电压、脉冲时间和脉冲次数等条件,采用不同参数组合并结合使用不同介质作为电转缓冲液将Cy3标记的阴性对照siRNA转染小鼠附植前胚胎.在荧光倒置显微镜下,观察胚胎的存活率、siRNA转染率以及阳性转染存活胚胎的囊胚发育率.结果显示小鼠附植前胚胎在使用台氏液消化胚胎透明带10s后,以opti-MEM作为电转缓冲液,电穿孔参数设置为30 V,1 ms,3次的条件下取得最佳转染效果.总之,电穿孔方法可实现siRNA简便、高效地转染小鼠附植前胚胎.
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