换一批
换一批摘要AAV-ITR单链DNA微载体是一种基于腺相关病毒(AAV)倒置末端重复序列(ITR)的基因表达载体(AAV-ITR ssDNA mini vector).前期研究已证明AAV-ITR单链DNA微载体在HEK 293T细胞中具有较高的转染、表达效率.本文中将相同拷贝数的AAV-ITR单链DNA微载体、3'-ITR末端错配的AAV-ITR单链DNA微载体(AAV-ITRmm ssDNA mutant vector)、AAV-ITR双链DNA和质粒分别用TurboFect转入小鼠骨骼肌中,比较检测AAV-ITR单链DNA微载体与其他基因表达载体在小鼠体内1周、1个月及3个月的表达效率.组织切片经荧光显微镜观察及荧光灰度值分析表明,相同分子摩尔数的AAV-ITR单链DNA微载体比AAV-ITR双链DNA和质粒在不同时期表达效率都要高且更稳定.提取注射3个月后的肌肉组织的DNA,用荧光定量PCR分析比较各载体的存留分子数.RT-PCR的结果显示AAV-ITR单链DNA微载体在注射3个月后的存留分子数较其他载体高.综合结果显示AAV-ITR单链DNA微载体在动物体内具有表达效率高和长久稳定的优势,有可能开发为基因治疗的一种高效、稳定的新型载体.
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关键词
腺相关病毒(AAV)倒置末端重复序列(ITR)基因表达微载体体内表达RT-PCR基因治疗Adeno-associated virus (AAV) Inverted terminal repeats (ITR) single strand DNA mini vector in vivo gene expression RT-PCR gene therapy
主题词
小鼠(Mice)基因表达(Gene Expression)肌, 骨骼(Muscle, Skeletal)病毒(Viruses)末端重复序列(Terminal Repeat Sequences)
栏目名称
医学与免疫生物技术
DOI
10.13345/j.cjb.140124
发布时间
2015-01-07
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