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利用优化改造的家蚕杆状病毒表达系统提高NS1表达产量

Modified baculovirus system for high expression of Bombyx mori bidensovirus NS1 in silkworm

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摘要摘要:为优化家蚕杆状病毒表达系统,提高外源基因的表达产量.文中通过同源重组技术,用串联的氯霉素基因(Cm)表达盒和绿色荧光蛋白基因(egfp)表达盒将其替换,从而获得Chitinase和Cystein Protease两个基因缺失的家蚕杆状病毒载体.通过转座,将多角体启动子控制的家蚕二分浓核病毒(BmBDV) ns1基因表达盒,定点插入到改造后的该分子载体中.将重组载体转染BmN细胞,获得能表达家蚕二分浓核病毒(BmBDV)NS1的缺失型重组病毒;另外,将多角体启动子控制的ns1基因转座到野生型Bm-bacmid中,获得能表达BmBDV NS1的野生型重组病毒.将这两种病毒分别皮下注射家蚕,对感染后的家蚕血液中NS1表达水平进行比较,发现缺失Chitinase和Cystein Protease重组病毒感染的家蚕血液中,NS1的表达量是对照组的3倍,从而建立了一种高效表达可溶性NS1蛋白的方法,为靶蛋白的结构与功能研究奠定基础.

作者李国辉 ^[1] 李芒芒 ^[1] 周倩 ^[1] 胡朝阳 ^[1] 唐琦 ^[1] 姚勤 ^[1] 学术成果认领

作者单位江苏大学生命科学研究院,江苏镇江,212013 ^[1]

关键词家蚕杆状病毒载体家蚕二分浓核病毒 NS1 Bm-bacmid Bombyx mori bidensovirus NS1

医学主题词蚕属(Bombyx)病毒(Viruses)浓核病毒属(Densovirus)基因(Genes)蛋白(Egg White)

栏目名称

生物技术与方法

DOI 10.13345/j.cjb.140403

发布时间 2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（(Nos.31270192.31272507.31402016)）江苏大学高级人才基金（(No.09JDG057)） National Natural Science Foundation of China （(Nos.31270192.31272507.31402016)） Startup Scientific Research Fund from Jiangsu University （(No.09JDG057)）