人IL-29的定点突变及抗肿瘤活性初步分析
Site-directed mutagenesis of human IL-29 and antineoplastic activity of the recombinant human IL-29 variant
摘要为探讨人白细胞介素-29 (hIL-29)变异体的抗肿瘤活性,根据hIL-29成熟肽的生物信息学分析数据,采用大引物PCR方法对其肽链第33位赖氨酸、35位精氨酸的编码基因进行定点突变,获得的hIL-29变异体基因构建重组真核表达质粒转化毕赤酵母(Pichia pastoris) GS 115进行发酵表达,经纯化得到重组人白细胞介素-29变异体蛋白(rhIL-29mut33,35).经CCK-8法检测抗肿瘤细胞增殖的数据显示,rhIL-29mut33,35对肝癌细胞BEL7402、结肠癌细胞HCT8和胃癌细胞SGC7901的增殖均具有抑制作用,高剂量组对这3种肿瘤细胞的增殖抑制率分别为(30.99±1.58)%、(22.47±1.37)%和(32.05±2.02)%,而且抗增殖作用比野生型rhIL-29的更强(P<0.01),表明变异体rhIL-29mut33,35具有潜在的医药开发价值.
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